發(fā)布時(shí)間: 2021-05-10 點(diǎn)擊次數: 1027次
PCR儀利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內In Vitro的大量合成?;旧纤抢肈NA聚合酶進(jìn)行專(zhuān)一性的連鎖復制,目前常用的技術(shù),可以將一段基因復制為原來(lái)的百億至千億倍。
PCR要素基本要具備:
要被復制的DNA模板Template、界定復制范圍兩端的引物Primers、DNA聚合酶Taq.Polymearse以及合成的原料(四種脫氧核苷酸)及水。
現在的PCR儀大都是用半導體制冷片來(lái)控制溫度的,其通電后一面熱另一面冷,反向電極則熱冷面反向。
半導體制冷片雖然是工業(yè)化生產(chǎn),都幾乎都是手工的生產(chǎn)的,因此每一片都有差別,大的生產(chǎn)商會(huì )根據用戶(hù)的需要進(jìn)行配對,如一臺PCR儀要三片就三片配成大致相同的阻值。阻值一般是廠(chǎng)家寫(xiě)在每片制冷片上的(自己用萬(wàn)用表是量不準的,因為一通電其溫度就變化,阻值就會(huì )改變)。
因此半導體片的質(zhì)量會(huì )影響PCR儀的均勻性。一般大的廠(chǎng)家出廠(chǎng)時(shí)問(wèn)題不大,但使用一段時(shí)間后,半導體片的性能會(huì )下降,但下降程度并不一致,則溫度差別就表現出來(lái)了。
主要問(wèn)題還是維修,半導體片本身是不能維修的。一般PCR儀都是多片半導體,普通維修會(huì )只更換其中一片,這樣就會(huì )造成新的跑得快,舊的跑得慢,溫度差別就大了。如果每片半導體片下面都有各自的溫度傳感器,則可以補償一些。當然更換半導體片后的裝配也是技術(shù)性很強的活,不經(jīng)過(guò)嚴格的培訓是做不到的。這也是為什么大廠(chǎng)一般不在現場(chǎng)維修,而是要返廠(chǎng),并且是一次性更換一套半導體片,因此成本較高。